Team:KIT-Kyoto/Notebook-week1p

From 2012.igem.org

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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week2p"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/9/94/Side_week2kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week3p"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/e/e0/Side_week3kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week5p"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/e/e7/Side_week5kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week6p"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/e/e8/Side_week6kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week1"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/1/1b/Side_week1kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week2"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/9/94/Side_week2kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week3"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/e/e0/Side_week3kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week4"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/3/31/Side_week4kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week5"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/e/e7/Side_week5kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week6"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/e/e8/Side_week6kit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-week7"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/b/b2/Side_weekkit7.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-Meeting-june"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/9/92/Side_junekit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
 +
                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-Meeting-july"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/f/f2/Side_julykit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
 +
                <li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-Meeting-august"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/f/fa/Side_augkit.jpg" width="150" height="30"></a></li><li><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-Meeting-september"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/8/8b/Side_sepkit.jpg" width="150" height="30"></a></li>
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            </ul>
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        </li>
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            <div class="category"><a href="https://2012.igem.org/Team:KIT-Kyoto/Notebook-Design"><img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/8/8f/Side_designnotekit.jpg" width="150" height="30"></a></div>
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        </li>
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<br>
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<td width="800px" height="510px" valign="top">
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<div id="MIGI">
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<h2>August 25th</h2>
 +
<br>
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<Table Border Cellspacing="0">
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 +
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 +
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<td>　dH<sub>2</sub>O　</td><td>　19uL　</td></tr>
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</Table>
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<br><BR>
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<Table Border Cellspacing="0">
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<Tr><Td></Td><Td>　All samples　</Td></Tr>
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<tr><td>　DNA template　</td><td>　0.5uL　</td></tr>
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<Tr><Td>　10× KOD plus buffer　</Td><Td>　10uL　</Td></Tr>
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<tr><td>　2mM dNTPs　</td><td>　10uL　</td></tr><tr>
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<td>　10P 5’ primer　</td><td>　3uL　</td></tr>
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<td>　10P 3’ primer　</td><td>　3uL　</td></tr>
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<td>　KOD plus　</td><td>　2uL　</td></tr>
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<td>　dH<sub>2</sub>O　</td><td>　68.3uL　</td></tr>
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<Table Border Cellspacing="0">
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<h2>August 26th</h2>
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<img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/6/6d/0826.png" width="500" height="300">
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<br>
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<h2>August 27th</h2>
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<Table Border Cellspacing="0">
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<Tr><Td>　pEGFP-C2(cut)　</Td><Td>　1uL　</Td></Tr>
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<img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/9/99/0826ckit.png" width="500" height="300">
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<h2>August 28th</h2>
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<h2>August 29th</h2>
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<br>
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<Table Border Cellspacing="0">
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<Tr><Td>　pEGFP-C2-1, -2, -3, -4　</Td><Td>　1uL　</Td></Tr>
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</Table>
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<br><BR>
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<img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/9/97/0828kit.png" width="500" height="300">
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<br><br>
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<Table Border Cellspacing="0">
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<Tr><Td>　25mM MgSO4　</Td><Td>　3.2uL　</Td></Tr>
 +
<td>　10P 5’ primer　</td><td>　3uL　</td></tr>
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<Tr><td>　KOD plus　</td><td>　2uL　</td></tr>
 +
<Tr><td>　dH<sub>2</sub>O　</td><td>　68.3uL　</td></tr>
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<Tr><td>　Total　</td><td>　100uL　</td></tr>
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</Table>
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<Table Border Cellspacing="0">
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<Tr><Td>　Temperature　</Td><Td>　Time　</Td><Td>　Cycle　</Td></Tr>
 +
<tr><td>　95℃　</td><td>　2min　</td><Td></Td></tr>
 +
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 +
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 +
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 +
<tr><td>　68℃　</td><td>　30sec(UAS) or 1min(EGFP)　</td><Td></Td></tr>
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</Table>
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<br><BR>
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<img src="https://static.igem.org/mediawiki/2012/d/d2/0829b.png" width="500" height="300">
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</div>
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</div>
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</td></tr>
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</body>
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</html>
</html>

Revision as of 09:57, 25 September 2012

August 25th


　All DNA　　500ng　　1ug　
　pEGFP-C　　3uL　　6uL　
　H buffer(TOYOBO)　　5uL　　5uL　
　BamHⅠ(TOYOBO)　　1uL　　1uL　
　BglⅡ(TOYOBO)　　1uL　　1uL　
　100×BSA　　0.5uL　　0.5uL　
　dH2O　　39.5uL　　36.5uL　
　Total　　50uL　　50uL　




　DNA sample　　23uL　
　4 buffer(NEB)　　5uL　
　EcoRⅠ-HF(NEB)　　1uL　
　SpeⅠ(NEB)　　1.5uL　
　100×BSA　　0.5uL　
　dH2O　　19uL　
　Total　　50uL　


　All samples　
　DNA template　　0.5uL　
　10× KOD plus buffer　　10uL　
　2mM dNTPs　　10uL　
　25mM MgSO4　　3.2uL　
　10P 5’ primer　　3uL　
　10P 3’ primer　　3uL　
　KOD plus　　2uL　
　dH2O　　68.3uL　
　Total　　100uL　


　Temperature　　Time　　Circle　
　　95℃　2min
　　95℃　15sec　25 cycle　
　　58℃　30min(UAS) or 2min10sec(pSB1C3)　25 cycle　
　　68℃　2min30sec　25 cycle　
　　68℃　2min30sec
　　14℃　∞


August 26th




August 27th


　pEGFP-C2(cut)　　1uL　
　Ligation high　　2.5uL　
　dH2O　　5uL　
　Total　　7.5uL　






August 28th


August 29th


　pEGFP-C2-1, -2, -3, -4　　1uL　
　10×H buffer(TOYOBO)　　0.5uL　
　XhoⅠ　　0.1uL　
　PstⅠ　　0.1uL　
　dH2O　　3.3uL　
　Total　　5uL　




　All samples　
　DNA template　　0.5uL　
　10× KOD plus buffer　　10uL　
　2mM dNTPs　　10uL　
　25mM MgSO4　　3.2uL　
　10P 5’ primer　　3uL　
　10P 3’ primer　　3uL　
　KOD plus　　2uL　
　dH2O　　68.3uL　
　Total　　100uL　


　Temperature　　Time　　Cycle　
　95℃　　2min　
　95℃　　15sec　　25 cycle　
　58℃　　30sec　　25 cycle　
　68℃　　30sec(UAS) or 1min(EGFP)　　25 cycle　
　68℃　　30sec(UAS) or 1min(EGFP)　
　14℃　　∞　




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